Sợi Tình Định Mệnh kể về Park Yeon, thiên tài âm nhạc xuất chúng của đầu triều đại Joseon, nhận được chiếu chỉ từ Đại vương Sejong yêu cầu thiết lập lại hệ thống âm luật quốc gia trong bối cảnh đất nước đang định hình nền móng bằng lễ nhạc. Mang trên vai trọng trách lớn lao, anh lao vào nghiên cứu không ngừng nghỉ nhưng liên tiếp đối mặt với thử thách và thất bại. Trong lúc ấy, tình cảm chân thành từ Bạch A, nữ danh cầm nổi tiếng với tiếng đàn Gayageum sâu lắng, lại trở thành một nỗi bối rối khác. Âm nhạc, trách nhiệm và con tim đan xen khiến cuộc đời Park Yeon bước sang một ngã rẽ đầy thử thách.